في اختبار ELISA نبحث عن المُستضد (البروتين الذي ترتبط به الأجسام المضادة) أو عن جسم مضاد معين نود الكشف عنه في دم المريض. يُعدّ الاختبار بحد ذاته اختبارًا نوعيًا وليس كميًا - النتيجة تُبَيِّن إذا ما كان المستضد موجودًا أم لا، فقط، من دون أن تقدم لنا معلومات عن تركيز المستضد في الدم. من أجل الحصول على نتيجة كمية، تُستخدم في بعض الأحيان تخفيفات معروفة في تركيز المستضد في عدة آبار. نبني من نتائج التخفيفات منحنًى مرجعيًا، وهو في الواقع عبارة عن معادلة تربط بين تركيز المستضد واللون الناتج في البئر. أخيرًا، من نتائج الآبار التي تم إدخال المصل إليها، بإمكاننا تقدير تركيز المستضد في الدم باستخدام المعادلة.

في الفيديو، تمّ عرض الاختبار ضمن الإصدار الذي يتمّ استخدامه من أجل العثور على أجسام مضادة، لكن يُمكن أيضًا استخدام هذه الطريقة من أجل العثور على بروتين معين. في هذه الحالة، يتم تغليف الآبار بالمُستضدات من دم المريض، ثم يُضاف لها محلول يحتوي على جسم مضاد معين ومعروف للمستضد المحدد. نظرًا لأنّ الجسم المضاد سوف يرتبط بشكلٍ خاصّ  ببروتين من نوع معين، فقط، إذا وُجِدَ المستضد الذي يربط الجسم المضاد في الدم نحصل على نتيجة إيجابية. أحيانًا تكون الآبار نفسها مُغلفة، منذ البداية، بالجسم المضاد لمنع ربط جميع البروتينات من الدم إلى قاع الآبار، الأمر الذي يزيد من خصوصية الطريقة ويضمن بقاء المستضدات ذات الصلة، فقط، في الآبار أثناء الاختبار.